【預期用途】 本試劑盒用于檢測豬血清中豬圓環(huán)病毒抗體。評估豬場豬圓環(huán)苗免疫狀況，感染豬的血清學診斷。 【原    理】本試劑盒系由預包被豬圓環(huán)病毒Ⅱ型（PCVⅡ）CAP重組蛋白的微孔板和酶標記二抗及其他配套試劑組成，應用酶聯免疫法（ELISA）原理檢測豬血清或血漿中豬圓環(huán)病毒Ⅱ型特異性抗體。實驗時，在包被板中加入對照血清和稀釋的待檢血清，經溫育后，若樣品中含有豬圓環(huán)病毒Ⅱ型的特異性抗體，則將與包被板上抗原結合，經洗滌除去未結合的抗體和其他成分后；再加入酶標二抗，與包被板上抗原抗體復合物發(fā)生特異性結合；再經洗滌除去未結合的酶結合物，在孔中加TMB底物液，與酶反應形成藍色產物，顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關；加入終止液終止反應后，產物變?yōu)辄S色；用酶標儀在450nm波長測定各反應孔中的吸光值，即可知樣品是否含有特異性抗體。 【試劑盒組成】

1.	豬圓環(huán)病毒Ⅱ型抗原預包被微孔板條	96T×1
2.	酶標記物  (紅蓋)	11ml×1
3.	樣品稀釋液  (黃蓋)	25ml×1
4.	20X濃縮洗滌液  (透明蓋)	20ml×1
5.	底物液A  (白蓋)	6ml×1
6.	底物液B  (黑蓋)	6ml×1
7.	終止液  (黃蓋)	6ml×1
8.	陽性對照 (紅蓋，已滅活)	0.5ml×1
9.	陰性對照 (綠蓋，已滅活)	0.5ml×1
10.	蓋板膜	1張
11.	自封袋	1個
12.	說明書	1份

                  【樣品制備】  取動物全血，按常規(guī)方法制備血清，要求血清清亮，無溶血、無污染。樣品短期可于2～8℃保存，長期需置-20℃保存。 【樣品稀釋】  用樣品稀釋液將待檢血清按40倍稀釋（如5μl血清加入195μl樣品稀釋液中，混勻）。陰、陽性對照不用稀釋。
 【洗滌液配制】濃縮洗滌液使用前應恢復至室溫（25℃左右），并搖動使沉淀的鹽溶解，然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋。
 【試驗操作方法】1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘，恢復至室溫。2.取所需用量包被微孔板條，設空白、陰性及陽性對照各2孔，未用的板條盡快密封，2～8℃保存。3.陰性、陽性對照孔分別加入陰性、陽性對照血清100μl；樣品孔每孔加入稀釋后的血清樣本100μl；空白對照孔不加。4.混勻，置37℃反應30分鐘。5.扣去孔內液體，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，重復洗滌5次，拍干。6.每孔加酶標記物100μl（空白孔除外）。置37℃反應30分鐘。7.洗滌，同步驟5。8.每孔依次加顯色劑A、顯色劑B各50μl，混勻，37℃避光反應10分鐘。9.每孔加終止液50μl，混勻，用空白孔調零，于450nm(630nm作參比波長）測定各孔吸光值（A450）。 【結果判定】定義：N=陰性對照孔平均A值；P=陽性對照孔平均A值；S=樣品孔A值；S/P=樣品孔A值/陽性對照孔平均A值。1.正常情況下，N≤0.10，P≥0.50。2.S/P≥0.18時判為陽性，S/P＜0.15時判為陰性，0.15≤S/P＜0.18時判為可疑。當本實驗結果為陰性或可疑時表明豬只抗體水平不足，建議補打相應疫苗。 【試驗方法的局限性】該試驗僅作為定性檢測豬圓環(huán)病毒Ⅱ型IgG抗體。 【注意事項】1.實驗操作時需戴手套、穿工作衣，嚴格健全和執(zhí)行消毒隔離制度，各種實驗廢棄物都應按傳染物處理。2.終止液具有腐蝕性，應避免接觸皮膚和衣物，如不慎接觸請立即用大量自來水沖洗。3.微孔板從冷藏環(huán)境中取出時應恢復至室溫方可開袋，未用完的微孔板需放入有干燥劑的密封袋中保存(包被板開封后請于2～8℃避光保存，使用期限為1個月)4.濃縮洗滌液在低溫時容易結晶，使用時需恢復至室溫以完全溶解。5.洗滌時各孔均需加滿液體，防止孔口有游離酶不能洗凈。6.用于檢測的樣品應保持新鮮。7.試驗結果的判定必須以酶標儀讀數為準。8.不同批號試劑組分不得混用。 【儲  存】原包裝應儲存于2～8℃保鮮冷藏，切勿冷凍。 【有效期】有效期12個月;生產日期、有效期、生產批號見外包裝。