苯并芘（BaP）ELISA檢測試劑盒（貨號：OUNUO95001）

1. 概述
苯并芘為含苯環(huán)的稠環(huán)芳烴。常見兩種形式：苯并（α）芘和苯并（e）芘，均具致癌性。其廣泛存在于環(huán)境中，來源主要為：1）工業(yè)生產(chǎn)和生活過程中煤炭、石油、天然氣等燃料不完全燃燒產(chǎn)生的尾氣；2）食物在熏制、烘烤和煎炸過程中，由脂肪、膽固醇、蛋白質(zhì)和碳水化合物在高溫下反應(yīng)形成。
2. 原理
苯并芘試劑盒采用間接競爭ELISA法，標(biāo)準(zhǔn)品或樣品中苯并芘（以下簡稱BaP），與預(yù)包被在微孔中的抗原競爭結(jié)合溶液中BaP抗體，經(jīng)酶結(jié)合物反應(yīng)，洗滌除去未反應(yīng)試劑，再經(jīng)底物顯色；標(biāo)準(zhǔn)品或樣品中BaP含量與其吸光度呈負(fù)相關(guān)
3. 產(chǎn)品特性
1）適用：動植物性食用油脂
2）檢測限：1.5μg/kg
3）定量范圍：2.0-20μg/kg
4）靈敏度：0.2μg/kg
5）精密度：批內(nèi)CV<10%；批間CV<15%
6）準(zhǔn)確度：90%±20%
7）檢測時間：30min

4. 實驗前，請將檢測試劑盒從 2-8℃冰箱中取出，于室內(nèi)溫度 20-28℃下平衡 1 小時！

試劑配制

標(biāo)準(zhǔn)品：取 0.1mL 標(biāo)準(zhǔn)品儲備液，加入 0.1mL 甲醇，混勻備用，不可久置，須及時使用

洗滌液（1X）：取 1 體積的 20X 濃縮洗滌液，加入 19 體積的去離子水或蒸餾水混勻，備用。

1）取出平衡后的適量板條，其余放回鋁膜袋中；

2）依次加 50μL 標(biāo)準(zhǔn)品/樣本于相應(yīng)微孔中；加 50μL 酶結(jié)合物和 50μL 抗體至所有微孔；輕敲板架；

【提示】

BaP SPE 柱（貨號：OUNUO6001）隨試劑盒一起配發(fā)

前處理所需試劑 A、試劑 B、試劑 C 配套在 BaP SPE柱中

【注意】

不小心取到下層水相，可以將移液器垂直后排出水相即可

3）蓋上板貼，于 20-28℃下，孵育 20 分鐘；倒出微孔中液體；

4）將洗滌液注滿微孔浸泡 15s 倒出，重復(fù) 3 次，共計 4 次；并于拍板布上盡可能干的拍出孔內(nèi)液體；

5）加 100μL 底物至微孔中，輕敲板架，蓋上板貼，于 20-28℃下，孵育 10 分鐘；

6）揭開板貼，不要倒出液體，直接加 100μL 終止液至微孔中，輕敲板架，于 450/630nm 波長下，讀數(shù)。