產(chǎn)品名稱:小鼠粒細(xì)胞噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA試劑盒
檢測方法:酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)
性狀:液體
規(guī)格:96T/48T
產(chǎn)品用途:科研 實驗
公司服務(wù):ELISA試劑盒 代測
經(jīng)營品牌:RD
保存條件及期
1.試劑盒保存:2-8℃。
2.期:6個月
運輸條件:低溫運輸,用干冰或者冰袋低溫運輸。
小鼠粒細(xì)胞噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA試劑盒操作問題:
試劑準(zhǔn)備不當(dāng)可能影響酶聯(lián)免疫吸附測定ELISA結(jié)果
在實驗室,對試劑準(zhǔn)備一般不太注意,通常的做法是,在實驗時將試劑從冰箱中拿出來即用,而忽略了這種做法有可能影響后面溫育時間不夠的問題,其直接的后果是對一些弱陽性標(biāo)本的檢測出現(xiàn)假陰性。
因此,在ELISA測定中試劑的準(zhǔn)備為關(guān)鍵的是,在實驗開始前,將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20min以上后,再進行測定,以使試劑盒在使用前與室溫平衡。這樣做的目的,主要是為了在后面的溫育反應(yīng)步驟中,能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地所要求的高度,以滿足測定要求。其次,目前的商品ELISA試劑盒中的洗板液均需在實驗室使用時對所提供的濃縮液稀釋配制,因此稀釋時所用的蒸餾水或去離子水應(yīng)質(zhì)量。
此外,當(dāng)試劑盒以OPD為底物時,則底物溶液應(yīng)在反應(yīng)顯色前臨時配制。
小鼠粒細(xì)胞噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA試劑盒樣品要求
·客戶需提供待檢測體和包被用原。
·檢測的樣本為細(xì)胞培養(yǎng)上清、人和動物的血清、血漿。
·樣本收集后應(yīng)立即-20℃保存,若長期保存應(yīng)-70℃。
·樣本量的要求:若一個指標(biāo)做復(fù)孔檢測應(yīng)不少于250ul,做單孔檢測應(yīng)不少于120ul。建議若客戶樣本量充足提供500ul以上。
·客戶的樣本收集后,立即按要求保存,切忌反復(fù)凍融。外地客戶郵寄需要用干冰運輸。郵寄前請與技術(shù)支持溝通確認(rèn)。
質(zhì)量管理
ELISA 是一種敏感性高、特異、重復(fù)性好的實驗診斷方法,由于其試劑穩(wěn)定、易保存、操作簡便、結(jié)果判斷較客觀等因素,以及既適宜于大規(guī)模篩查試驗又可以用于少量標(biāo)本的檢測,既可以做定性試驗也可以做定量分析等優(yōu)點,已廣泛應(yīng)用于微生物學(xué)、學(xué)、學(xué)和細(xì)胞因子等領(lǐng)域。ELISA 的影響因素較多,加強質(zhì)量管理才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點。
分析前質(zhì)控
●人員培訓(xùn) 實驗是人操作的,因此檢驗人員需經(jīng)過培訓(xùn),熟練掌握本如下幾方面的技術(shù)知識:
◎檢驗項目的基本原理 (ELISA 原理);
◎意義;
◎熟悉檢測技巧,了解易出差錯的環(huán)節(jié)及難點;
◎熟悉檢測試劑性能(包括試劑盒組成,包被片段及其組成);
◎ 熟悉檢測儀器的原理及性能;掌握數(shù)據(jù)處理的能力和質(zhì)量控制知識。
◎某些項目的檢測如 HIV 等需經(jīng)組織的專門培訓(xùn)班,考試合格后持證上崗。
分析前質(zhì)控
◎ELISA 原理:1971 年Engvall 等人把免疫組化的EIA 技術(shù)應(yīng)用于檢驗發(fā)展為ELISA 技術(shù)。
特點 :在固相表面組裝免疫物質(zhì)形成"免疫吸附劑"
酶標(biāo)記免疫物質(zhì),進行信號放大;
有二步溫育反應(yīng)二次洗滌過程;
靈敏度特異性相對較高。
局限性:只能檢測到 ng 水平
精密度差(批內(nèi)CV15-20%);
線性范圍窄(一個數(shù)量級);
存在"HD-HOOK"效應(yīng)。
小鼠粒細(xì)胞噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA試劑盒回收率
elisa試劑盒回收率是反應(yīng)待測物在樣品分析過程中的損失的程度,損失越少,回收率越高,如果作標(biāo)液1PPM,就是1毫克/升,而作出標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)為0.99毫克/升,就是說你的回收率是99%,這個與真實成分有密切的關(guān)系,說明方法的準(zhǔn)確度。比如水中總無機氯含量測定,樣品水中含有無機氯20mg/L,取100mL被測水樣品,加入0.1mL濃度為10mg/mL的含無機氯標(biāo)準(zhǔn)樣品,測定時忽略體積變化,如果測定出樣品中無機氯為2.98mg/L,則認(rèn)為回收率為98%。
對于定量檢測來說,主要還是一個準(zhǔn)確度的驗證。不過我看到別人寫的內(nèi)容比我自己想說的要好,所以就貼上去了。相對回收率可能會高于100%的,如果只是說“損失程度”,其實是不準(zhǔn)確的。應(yīng)該說,回收率越接近100%,說明這個試劑盒的準(zhǔn)確度越高。
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